پایش و تایید نتایج ضد عفونی و استریلیزاسیون پراکسید هیدروژن در کابینت های ایمنی زیستی

پس از استفاده از پراکسید هیدروژن (به خصوص پراکسید هیدروژن بخار شده VHP) برای ضدعفونی و استریل کردن در کابینت های ایمنی زیستی، نظارت دقیق و علمی و تأیید نتایج تنها راه تأیید اثربخشی استریلیزاسیون و همچنین الزامات اصلی برای کنترل کیفیت و انطباق با مقررات است. این فقط یک فرآیند «اجرای دستگاه» نیست، بلکه یک فرآیند حلقه بسته- است که به چندین شواهد فیزیکی، شیمیایی و بیولوژیکی نیاز دارد.
در زیر تجزیه و تحلیل سیستماتیک تکنیک های نظارت و اعتبار سنجی ارائه شده است.
اصل اصلی: سیستم تأیید سه گانه
یک اعتبارسنجی کامل باید شامل «پایش پارامترهای فرآیند»، «شاخص‌های شیمیایی» و «آزمایش چالش شاخص بیولوژیکی» باشد که همگی مکمل یکدیگر بوده و ضروری هستند.

این اولین خط دفاعی برای راستی‌آزمایی است، که شامل ثبت-زمان واقعی پارامترهای فیزیکی و شیمیایی کلیدی از طریق حسگرهای دستگاه می‌شود و ثابت می‌کند که چرخه عقیم‌سازی در محدوده پارامتر تنظیم شده و مؤثر عمل می‌کند.
پارامترهای مانیتورینگ:
غلظت بخار پراکسید هیدروژن (ppm): بحرانی ترین پارامتر. باید در غلظت هدف از پیش تعیین شده (به عنوان مثال صدها ppm) برای مدت زمان کافی به دست آید و حفظ شود. غلظت کم می تواند منجر به شکست استریلیزاسیون شود.
رطوبت نسبی (% RH): در سطح پایین (معمولاً) کنترل می شود<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
دما: دمای محفظه را کنترل کنید که بر فشار بخار اشباع و فرآیند میعان تأثیر می گذارد.
فشار/جریان هوا: مطمئن شوید محفظه آب بندی شده و گردش گاز طبیعی است.
زمان قرار گرفتن در معرض: مدت زمان حفظ شده در غلظت هدف.
نحوه اجرا:
به طور خودکار توسط سنسورها و سیستم کنترل تعبیه شده در ژنراتور VHP تکمیل می شود.
الزامات کلیدی: تجهیزات باید قادر به تولید و ذخیره نمودارهای کامل داده های چرخه ای (منحنی زمان تمرکز، منحنی دما و رطوبت) باشد که باید به عنوان بخشی از گزارش اعتبار سنجی گنجانده شود. هر گونه انحراف پارامتر از محدوده از پیش تعیین شده باید منجر به زنگ هشدار یا خاتمه حلقه شود.

برای تعیین سریع و شهودی اینکه آیا یک مورد در معرض محیط استریلیزاسیون پراکسید هیدروژن قرار دارد یا خیر استفاده می شود و می تواند به طور غیرمستقیم نشان دهد که آیا دوز کافی است یا خیر.
نوع و اصل:
کارت نشانگر شیمیایی نوع برچسب: حاوی رنگ های حساس به پراکسید هیدروژن است. هنگامی که مقدار کافی دوز پراکسید هیدروژن (غلظت x زمان) انباشته شود، تغییرات غیرقابل برگشتی از یک رنگ به رنگ دیگر رخ می دهد.
محل قرار دادن: باید در سخت ترین محل استریلیزاسیون قرار گیرد، مانند:
عمیق ترین گوشه فضای کار کابینت ایمن.
داخل کانال زهکشی
اتصال بین فیلتر و قاب نصب (در صورت امکان).
لوله اگزوز داخلی (در صورت پوشش ضد عفونی).
عملکرد و محدودیت ها:
عملکرد: ارائه نتایج فوری برای انتشار سریع. اطمینان حاصل کنید که بخار در محل تعیین شده توزیع شده است. به عنوان یک شناسه برای تمایز بین اقلام "پردازش شده" و "فرآوری نشده".
محدودیت ها: فقط می تواند قرار گرفتن در معرض را ثابت کند، نمی تواند عقیمی را ثابت کند. تغییر رنگ فقط نشان دهنده رسیدن به آستانه حداقل دوز است، اما کشتن همه میکروارگانیسم ها را تضمین نمی کند.

این استاندارد طلایی تأیید و شواهد قاطع است. با استفاده از هاگ های میکروبی استاندارد شده با مقاومت بالا، مستقیماً ثابت می شود که فرآیند عقیم سازی برای از بین بردن سخت ترین میکروارگانیسم ها کافی است.
انتخاب شاخص های بیولوژیکی:
سویه استاندارد: اسپورهای Geobacillus stearothermophilus. این باکتری تست استاندارد بین المللی با قوی ترین مقاومت در برابر پراکسید هیدروژن است.
شکل حامل: معمولاً نوار کاغذ رنگی قطرات تعلیق اسپور، ورق فولادی ضد زنگ یا نصب شده بر روی یک حامل خاص.
تعداد شناخته شده هاگ: هر شاخص بیولوژیکی حاوی تعداد مشخصی از هاگ است، معمولاً 10 ^ 5 تا 10 ^ 6 CFU (واحد تشکیل کلونی).
استراتژی قرار دادن (بسیار حیاتی ترین مرحله):
محل سکونت: باید در "سردترین نقطه" که در آن عقیم سازی چالش برانگیزتر است یا جایی که گاز نفوذ آن دشوارتر است، قرار گیرد. برای کابینت های ایمنی زیستی، مکان های توصیه شده عبارتند از:
زیر میز کار، در گوشه ای نزدیک جلوپنجره.
محل اتصال دیوار پشتی و میز کار.
در پشت یا در شکاف ابزارهای داخلی مانند نگهدارنده پیپت.
اگر محدوده تأیید شامل داخل دریچه اگزوز یا خط لوله باشد.
مقدار: حداقل از 3 شاخص بیولوژیکی استفاده کنید و یک کنترل مثبت درمان نشده را شامل شود.
فرآیند تست و تفسیر:
قرار گرفتن در معرض: یک چرخه کامل استریلیزاسیون VHP را با کابینت BI انجام دهید.
بازیافت و کشت:
پس از اتمام چرخه، BI را در شرایط استریل بردارید.
آن را در یک لوله بازیابی اختصاصی حاوی محیط کشت قرار دهید.
در انکوباتور 56-60 درجه سانتیگراد به مدت 24-48 ساعت (زمان مشخص طبق دستورالعمل) کشت کنید.
کشت همزمان شاهد مثبت (غیر استریل) و شاهد منفی (محیط کشت استریل).
تفسیر نتیجه:
تأیید موفقیت‌آمیز: تمام محیط‌های کشت BI استریل شده شفاف باقی می‌مانند (بدون تغییر رنگ/ کدورت)، که نشان‌دهنده عدم بقای اسپور است. کنترل مثبت باید رشد فعال (زردی/ کدورت محیط کشت) را نشان دهد و کنترل منفی باید روشن بماند.
شکست تأیید: هر BI پردازش شده که رشد را نشان دهد (زردی/ کدورت) نشان دهنده شکست چرخه عقیم سازی است. لازم است دلایل (مانند خطاهای پارامتر، محل قرارگیری، خرابی تجهیزات، مسائل آب بندی و ...) به طور کامل بررسی شود، پلان تنظیم شود و مجدداً بررسی کامل انجام شود.

تایید اول:
پس از نصب تجهیزات VHP یا استریل اولیه نوع جدیدی از کابینت ایمنی، باید انجام شود.
این جامع ترین تأیید است که نیاز به تعیین "سردترین نقطه" و ایجاد پارامترهای حلقه موثر دارد.
اعتبار سنجی مجدد منظم:
معمولاً هر شش ماه یا سالانه انجام می شود.
برای تأیید سازگاری تجهیزات، برنامه ها و اپراتورها استفاده می شود.
نظارت روزانه:
برای هر چرخه استریلیزاسیون باید از شاخص های شیمیایی استفاده شود و نقشه های پارامترهای فرآیند باید بررسی شوند.
فرکانس آزمایش نشانگرهای بیولوژیکی را می توان به صورت مناسب کاهش داد (مانند ماهانه یا سه ماهه)، اما مناطقی با مقررات سختگیرانه ممکن است نیاز به استفاده از هر دسته/چرخه داشته باشند.

تمام فعالیت‌های نظارت و راستی‌آزمایی باید به‌طور رسمی مستند شوند و گزارش باید حداقل شامل موارد زیر باشد:
اطلاعات تجهیزات: مدل و شماره ژنراتور VHP.
اطلاعات دستگاه هدف: مدل کابینت ایمنی زیستی، شماره، مکان.
پارامترهای حلقه: غلظت هدف، زمان، دما و رطوبت و غیره را تنظیم کنید.
نمودار داده های فرآیند: منحنی زمان تمرکز عملیات واقعی و غیره.
نشانگرهای شیمیایی: نوع، شماره دسته، محل قرارگیری، نتایج تغییر رنگ (با عکس‌های پیوست شده).
شاخص های بیولوژیکی: سویه، تعداد دسته، مقدار اسپور، محل قرارگیری، نتایج کشت (ضمیمه شده با عکس های لوله کشت).
نتیجه گیری: به وضوح مشخص کنید که آیا چرخه استریلیزاسیون موثر است یا خیر.
مجری و تاریخ: امضای متصدی و بازبینی کننده.

خلاصه
عقیم سازی بدون استریل کردن معادل عدم استریل کردن است.
یک سیستم اعتبارسنجی قابل اعتماد برای ضدعفونی پراکسید هیدروژن و استریل کردن کابینت های ایمنی زیستی عبارت است از:
اطمینان از کنترل فرآیند از طریق "نقشه برداری پارامترهای فرآیند"، دستیابی به انتشار سریع بصری از طریق "شاخص های شیمیایی"، و در نهایت دریافت گواهینامه اثربخشی نهایی میکروبیولوژیکی از طریق "تست چالش شاخص بیولوژیکی".
این سیستم اعتبار سنجی سه گانه، کلید ارتقای گندزدایی پراکسید هیدروژن از یک "عملیات" به یک "علم" قابل ردیابی، تکرارپذیر و قابل اعتماد است، و همچنین سنگ بنای برآورده کردن الزامات GLP، GMP، و تاییدیه آزمایشگاه ایمنی زیستی در داخل و خارج از کشور است. مدیران آزمایشگاه باید این را به عنوان یک رویه اجباری اجرا کنند و به طور مستمر بر آن نظارت کنند.